背景：
在生物(wù)制品的制備/生産(chǎn)過程中(zhōng)，去除DNA殘留是極為(wèi)重要的。在過去幾年裏，重組蛋白類生物(wù)藥物(wù)的發展突飛猛進，并且在未來依然前景廣闊。在微生物(wù)系統中(zhōng)，這些重組蛋白一般都是通過微生物(wù)的發酵，并且通過裂解微生物(wù)細胞而釋放出來。然而，在釋放出目标産(chǎn)物(wù)的同時，細胞裂解物(wù)會同時産(chǎn)生一些雜産(chǎn)物(wù)，比如宿主細胞蛋白、核酸（DNA以及RNA）、細胞内毒素以及一些其他(tā)宿主細胞雜質(zhì)。重組蛋白藥物(wù)、病毒疫苗等生物(wù)制品中(zhōng)的DNA殘留可(kě)能(néng)會給患者體(tǐ)内帶入激活的緻癌基因，或者作(zuò)為(wèi)潛在的感染病毒DNA緻使患者被感染。因此，DNA殘留量是重組蛋白藥物(wù)的一個重要的評價标準。世界上許多(duō)權威機構都對重組蛋白類藥物(wù)中(zhōng)的宿主DNA殘留量做出了嚴格的規定，對于每支疫苗中(zhōng)的DNA殘留量，WHO規定不可(kě)以超過l0ng，美國(guó)FDA規定不可(kě)以超過10pg，我國(guó)規定為(wèi)100pg以下。
概述：
NuclecutTM全能(néng)核酸酶（SuperNuclease）是一種核酸内切酶，可(kě)将核酸降解成2~5個堿基的5'-單磷酸核苷酸，因其能(néng)高效降解任何形式（雙鏈，單鏈，線(xiàn)狀，環狀）的DNA和RNA而沒有(yǒu)蛋白裂解活性，因此被稱為(wèi)“全能(néng)核酸酶”。全能(néng)核酸酶可(kě)以非特異性裂解單鏈以及雙鏈的DNA和RNA，并切割出一個3'-OH和5'-磷酸基（如圖1），主要用(yòng)于重組蛋白、病毒疫苗、細胞和基因治療用(yòng)病毒載體(tǐ)、溶瘤病毒及其它生物(wù)制品中(zhōng)DNA/RNA去除。該酶在0~42℃的均有(yǒu)活性，最适溫度為(wèi)37℃。有(yǒu)效的pH範圍為(wèi)6.0-10.0，最适pH為(wèi)8.0。發揮活性需要Mg2+存在，1-2mM為(wèi)最佳。在去污劑、SDS、尿素等存在下仍然保持一定活性。
圖1. 全能(néng)核酸酶的作(zuò)用(yòng)位點
産(chǎn)品包裝(zhuāng)：
NuclecutTM GMP級全能(néng)核酸酶（SuperNuclease-GMP）包裝(zhuāng)規格如下：
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目錄号 |
規格 |
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GMP-RA-NC01-A |
10KU |
| GMP-RA-NC01-B |
50KU |
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GMP-RA-NC01-C |
500KU |
産(chǎn)品儲存于20mM Tris-HCI，pH8.0，2mM MgCl2，20mMNaCl和50%（v/v）甘油中(zhōng)，不添加防腐劑。
産(chǎn)品來源：
NuclecutTM GMP級全能(néng)核酸酶序列來源于Serratiamarcescens，重組表達于E. coli，單體(tǐ)理(lǐ)論分(fēn)子量約27.5KD，C端帶6×His标簽。
産(chǎn)品特性：
全能(néng)核酸酶可(kě)非特異性降解所有(yǒu)形式的DNA和RNA（單鏈的、雙鏈的、線(xiàn)性的和環化的），将核酸完全消化為(wèi)長(cháng)度為(wèi)3至5個堿基的5'-單磷酸末端寡核苷酸。
NuclecutTM GMP級全能(néng)核酸酶采用(yòng)非動物(wù)源性原料， 不添加抗生素，符合GMP生産(chǎn)标準，滿足法規要求。适用(yòng)于重組蛋白、病毒疫苗、細胞和基因治療用(yòng)病毒載體(tǐ)、溶瘤病毒及其它生物(wù)制品中(zhōng)DNA/RNA去除。
産(chǎn)品質(zhì)量：
1. 高活性：≥1.1×106U/mg 蛋白、≥250U/μl；
2. 高純度：通過SDS-PAGE檢測，純度≥95%；通過 SEC-HPLC分(fēn)析确定，純度 ≥99 %；
3. 無蛋白酶活性：偶氮酪蛋白法分(fēn)析無蛋白酶活性；
4. 内毒素：由重組C因子法确定每1000 U核酸酶内毒素含量< 0.01 EU；
5. 微生物(wù)檢測：< 10 CFU/1×106U。
儲存條件：
采用(yòng)幹冰運輸，收到産(chǎn)品後請立即将其置于-20℃保存。
應用(yòng)：
1. 可(kě)從重組蛋白及其它生物(wù)制品中(zhōng)去除DNA/RNA
2. 适用(yòng)于病毒疫苗、細胞和基因治療用(yòng)病毒載體(tǐ)及溶瘤病毒的純化
3. 降低由核酸引起的粘度；
4. 在二維凝膠電(diàn)泳和色譜中(zhōng)制備樣品
5. 防止細胞結塊，尤其是冷凍細胞
6. 降低哺乳動物(wù)細胞提取物(wù)的粘度
7. 降低大腸杆菌細胞裂解液的粘度以增強過濾性
8. 從包涵體(tǐ)中(zhōng)純化蛋白
若需要其它包裝(zhuāng)規格，是否可(kě)以接受定制？
可(kě)以。若需GMP條件下生産(chǎn)的藥用(yòng)級大包裝(zhuāng)，請咨詢客服電(diàn)話0512-87663137，或發送電(diàn)子郵件至techserv@rhinobio.com。
什麽樣的質(zhì)量/數量的酶對特定的應用(yòng)是足夠的?
有(yǒu)幾個參數如溫度及酶切體(tǐ)系會影響酶的活性，因此最佳條件将因工(gōng)藝而異，需要通過實驗來确定。
實驗過程中(zhōng)，我需要在哪一步加入全能(néng)核酸酶？如果在低溫下工(gōng)作(zuò)，需要添加多(duō)少全能(néng)核酸酶？
這取決于使用(yòng)全能(néng)核酸酶的目的，但一般情況下，酶的添加最好是在培養後和捕獲步驟之前。
在溫度低于37℃時，酶的效率降低，補償這種效率下降所需的量因過程而異，并取決于現有(yǒu)的其他(tā)參數。通常，增加另一個參數，如孵育時間，可(kě)以在不需要增加酶用(yòng)量的情況下進行補償。
為(wèi)什麽全能(néng)核酸酶作(zuò)用(yòng)後沒效果？什麽會抑制其活性？
全能(néng)核酸酶活性範圍較廣，而1-2mM Mg2+的濃度對全能(néng)核酸酶的活性至關重要。
Mn2+可(kě)以替代Mg2+；在Mg2+的存在下，酶活性達到最佳。一價陽離子濃度>300mM，磷酸鹽濃度>100mM，以及硫酸铵濃度>100mM都會抑制約50%的活性。此外，>1mM EDTA濃度也會抑制全能(néng)核酸酶的活性。
酶活降低是為(wèi)什麽？
全能(néng)核酸酶通常非常穩定，然而在極少數情況下，會導緻活性喪失。可(kě)能(néng)原因有(yǒu)：
1）不可(kě)逆失活可(kě)能(néng)是由于樣品中(zhōng)存在變性劑或蛋白酶，或是存儲不當。
2）可(kě)逆失活通常是由于螯合劑的存在，如EDTA，它可(kě)以螯合去除活性必需的鎂離子。
說明書
COAs
MSDS