背景:
抗體(tǐ)依賴的細胞介導的細胞毒性作(zuò)用(yòng)(Antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity, ADCC)是免疫系統對抗病毒感染及腫瘤疾病的一種重要免疫防禦機制。抗體(tǐ)通過與靶細胞表面抗原特異性結合,招募如自然殺傷(Natural killer, NK)細胞等效應細胞殺死靶細胞。NK細胞表面表達FcγRIIIa蛋白,是一種抗體(tǐ)Fc區(qū)域的受體(tǐ),能(néng)識别并結合抗體(tǐ)的Fc端,從而使NK細胞結合到靶細胞周圍。一旦Fc受體(tǐ)與抗體(tǐ)的Fc區(qū)域結合,NK細胞就會釋放細胞因子和細胞毒性顆粒,進入靶細胞觸發細胞凋亡。傳統的ADCC檢測方法是利用(yòng)外周血單核細胞(Peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)或者從其中(zhōng)分(fēn)離得到NK細胞作(zuò)為(wèi)效應細胞進行檢測,該方法的效應細胞較難獲取,且方法變異性大、操作(zuò)繁瑣。
Rhinogen®ADCC Reporter Bioassay是一種生物(wù)發光報告基因檢測方法,用(yòng)于檢測抗體(tǐ)的ADCC生物(wù)學(xué)活性。其作(zuò)用(yòng)機理(lǐ)基于NFAT(Nuclear factor of activated T-cells)反應通路(圖NFAT應答(dá)元件驅動表達的螢火蟲螢光素酶。抗體(tǐ)通過與效應細胞表面FcγRIIIa的結合,激發細胞内NFAT反應元件,NFAT反應元件則驅動螢火蟲熒光素酶的表達。熒光素酶活性通過生物(wù)發光進行定量。
圖1.Rhinogen®ADCC Reporter Bioassay原理(lǐ)圖
包裝(zhuāng)規格:
目錄号 | 規格 |
RA-CK01 |
1×1ml |
特點:
Rhinogen® ADCC報告基因檢測系統提供的ADCC生物(wù)學(xué)活性檢測方法操作(zuò)具(jù)有(yǒu)操作(zuò)簡便(圖2)、變異性低、靈敏度高等特點,并可(kě)與多(duō)種不同的靶細胞搭配使用(yòng)。
1. 原理(lǐ)明确:基于抗體(tǐ)結合細胞對效應細胞FcγRIIIa受體(tǐ)信号通路的激活
2. 應用(yòng)廣泛:治療性抗體(tǐ)藥物(wù)的Fc功能(néng)學(xué)研究和産(chǎn)品質(zhì)控、ADCC作(zuò)用(yòng)機制研究
3. 操作(zuò)簡便:檢測過程簡單,檢測試劑易用(yòng)
4. 适用(yòng)性廣:該系統已完成針對懸浮或貼壁的多(duō)種靶細胞的适用(yòng)性驗證,效果良好
5. 靈敏度高:可(kě)靈敏的檢測到抗體(tǐ)糖型的改變
6. 穩定性好:傳代30次仍可(kě)穩定靈敏檢測,數據重複性好
Rhinogen® ADCC報告基因檢測系統的各項特性使得其可(kě)作(zuò)為(wèi)抗體(tǐ)篩選、抗體(tǐ)糖基化修飾等研究的有(yǒu)效手段。同時,該法可(kě)作(zuò)為(wèi)抗體(tǐ)藥物(wù)ADCC活性的常規檢測方法及批簽發檢測指标。
圖2.Rhinogen®ADCC Reporter Bioassay檢測流程圖
運輸及儲存:
運輸方式:幹冰運輸
儲 存:收到細胞後,請立即将ADCC Bioassay 效應細胞凍存管轉移至-140°C以下的保存條件長(cháng)期保存。