背景:
血管内皮生長(cháng)因子(VascularEndothelial GrowthFactor,VEGF),是細胞内刺激血管生成的信号蛋白,具(jù)備促進血管新(xīn)生和再生的功能(néng)。細胞内VEGF通過結合并活化細胞表面的血管内皮生長(cháng)因子受體(tǐ)(VascularEndothelial GrowthFactor Receptor,VEGFR,又(yòu)稱酪氨酸激酶受體(tǐ)),最終導緻血管生成。VEGFR有(yǒu)幾種亞型:VEGFR1,VEGFR2,VEGFR3。VEGFR2(又(yòu)稱KDR)介導幾乎所有(yǒu)已知的受體(tǐ)對VEGF的細胞應答(dá)。VEGF/VEGFR靶點抗體(tǐ)通過特異性的結合VEGF/VEGFR,從而抑制下遊信号通路,實現抑制血管生成。
單克隆抗體(tǐ)藥物(wù)的生物(wù)學(xué)活性作(zuò)為(wèi)其關鍵質(zhì)量屬性在質(zhì)控中(zhōng)備受關注,目前用(yòng)于測定VEGF/VEGFR靶點抗體(tǐ)生物(wù)學(xué)活性的經典方法為(wèi)HuVEC增殖抑制法,其工(gōng)作(zuò)細胞為(wèi)原代細胞,實驗周期長(cháng),變異性大且操作(zuò)複雜,為(wèi)了保證用(yòng)藥的安(ān)全性和時效性,滿足質(zhì)量檢驗的需求,急需建立一種簡單,快速,精(jīng)确的檢測方法用(yòng)于VEGF/VEGFR靶點抗體(tǐ)生物(wù)學(xué)活性檢測。Rhinogen® VEGF Reporter Bioassay是一種生物(wù)發光報告基因檢測方法,其作(zuò)用(yòng)機理(lǐ)(圖1)基于VEGF與KDR的結合來刺激細胞應答(dá)。本系統采用(yòng)工(gōng)程改造的HEK293細胞作(zuò)為(wèi)測活細胞,該細胞株穩定表達VEGFR2以及由NF-κB應答(dá)元件驅動表達的螢火蟲熒光素酶。當VEGF與測活細胞結合時,受體(tǐ)轉導細胞内信号進而産(chǎn)生光;Anti -VEGF抗體(tǐ)或Anti -KDR抗體(tǐ)抑制VEGF與KDR結合會導緻發光下降。 因此在一定濃度的VEGF存在的情況下,可(kě)檢測不同阻斷劑(如:Anti-VEGF抗體(tǐ))對VEGF通路的影響。
圖1. Rhinogen® VEGF Reporter Bioassay原理(lǐ)圖
産(chǎn)品規格:
目錄号
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成分(fēn)
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規格
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RA-CK24
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VEGF Reporter Bioassay(5×106cells/ml)
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1×1ml
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特點:
Rhinogen® VEGF報告基因檢測系統具(jù)有(yǒu)操作(zuò)簡便、變異性低、穩定性好等特點。
1. 應用(yòng)廣泛:可(kě)作(zuò)為(wèi)針對VEGF/VEGFR靶點藥物(wù)篩選及檢測的有(yǒu)效手段 ;
2. 操作(zuò)簡便:檢測過程簡單,檢測試劑易用(yòng);
3. 穩定性好:傳代20次仍可(kě)穩定靈敏檢測,數據重複性好。
Rhinogen® VEGF報告基因檢測系統的各項特性使得其可(kě)作(zuò)為(wèi)針對VEGF靶點藥物(wù)篩選及檢測的有(yǒu)效手段。同時,該法可(kě)作(zuò)為(wèi)針對VEGF/VEGFR靶點藥物(wù)的生物(wù)學(xué)活性常規檢測方法及批簽發檢測指标。
運輸及存儲:
運輸方式:幹冰運輸
儲 存:收到細胞後,請立即将細胞凍存管轉移至-140°C以下的保存條件長(cháng)期保存。