背景:
促甲狀腺激素受體(tǐ)(Thyroid-stimulating hormone receptor, TSHR)主要存在甲狀腺濾泡細胞膜上,在人體(tǐ)生理(lǐ)及病理(lǐ)情況下都發揮着重要作(zuò)用(yòng)。TSHR為(wèi)促甲狀腺激素(Thyroid-stimulating hormone, TSH)的特異性受體(tǐ),是一種G蛋白偶聯受體(tǐ),TSH通過與細胞表面的TSHR結合,觸發細胞内cAMP的産(chǎn)生,作(zuò)為(wèi)第二信使的cAMP通過識别其位于基因啓動子區(qū)的特異性反應元件CRE(cAMP response elements)對下遊基因進行調控。TSHR表達細胞株是TSH及TSHR相關研究的有(yǒu)效手段,該方法需對細胞中(zhōng)産(chǎn)生的cAMP進行定量,需要昂貴的試劑盒和繁瑣的ELISA檢測步驟[1]。
圖1. TSHR信号通路[2]
Rhinogen® TSHR Reporter Bioassay是一種生物(wù)發光報告基因檢測方法,其作(zuò)用(yòng)機理(lǐ)(圖2)基于TSHR反應的主要信号通路cAMP/PKA信号途徑。本系統采用(yòng)工(gōng)程改造的中(zhōng)國(guó)倉鼠卵巢細胞(Chinese hamster ovary cells,CHO cells)作(zuò)為(wèi)測活細胞,該細胞株穩定表達TSHR以及由CRE反應元件驅動表達的螢火蟲熒光素酶。在該細胞中(zhōng),TSHR的激活觸發cAMP的産(chǎn)生,cAMP則激活熒光素酶基因的表達,而熒光素酶的活性通過生物(wù)發光進行定量。
圖2.Rhinogen® TSHR Reporter Bioassay原理(lǐ)圖
産(chǎn)品規格:
目錄号 | 成分(fēn) | 規格 |
RA-CK08 |
TSHR報告基因測活細胞(5×106cells/ml) |
1×1ml |
Rhinogen® TSHR報告基因檢測系統提供的TSHR相關生物(wù)學(xué)活性檢測方法操作(zuò)具(jù)有(yǒu)操作(zuò)簡便(圖3)、變異性低、量效關系良好、靈敏度高等特點。
1. 原理(lǐ)明确:基于TSHR反應的主要信号通路cAMP/PKA信号途徑;
2. 應用(yòng)廣泛:可(kě)用(yòng)于TSH的微量測定、TSHR拮抗劑的高通量篩選、TSH和TSHR作(zuò)用(yòng)機理(lǐ)研究;
3. 通 量 高:可(kě)在96孔、384孔培養闆中(zhōng)進行測定;
4. 快速易用(yòng):檢測過程簡單,檢測試劑易用(yòng);
5. 信噪比高:信号/背景的比率高。
Rhinogen® TSHR報告基因檢測系統的各項特性使得其可(kě)作(zuò)為(wèi)針對TSH和TSHR相關研究、TSHR藥物(wù)篩選及檢測的有(yǒu)效手段。同時,該法可(kě)作(zuò)為(wèi)針對TSHR藥物(wù)的生物(wù)學(xué)活性常規檢測方法及批簽發檢測指标。
圖3. Rhinogen®TSHR Reporter Bioassay檢測流程圖
運輸及存儲:
運輸方式:幹冰運輸
儲 存:收到細胞後,請立即将TSHR報告基因測活細胞凍存管轉移至-140°C以下的保存條件長(cháng)期保存。
參考文(wén)獻:
[1] 王少豔, 馮憑, 方佩華. 人促甲狀腺激素受體(tǐ)的表達及其抗體(tǐ)的檢測. 國(guó)際内分(fēn)泌代謝(xiè)雜志(zhì) Intern J Endocrinol Metab, 2006, 26(3): 178-180
[2] Tetsuo Kondo, Shereen Ezzat and Sylvia L. Asa. Pathogenetic mechanisms in thyroid follicular-cell neoplasia. NATURE REVIEWS CANCER. 2006, 6: 292-306。