背景:

       報告基因檢測是基因表達調節研究的重要手段，目前已被廣泛應用(yòng)于分(fēn)子生物(wù)學(xué)及細胞生物(wù)學(xué)研究領域。報告基因檢測法是一種将轉錄調控和報告基因（如熒光素酶）偶聯表達，通過報告基因表達産(chǎn)物(wù)（如熒光素酶）活性的測定判斷細胞刺激物(wù)（如小(xiǎo)分(fēn)子化合物(wù)、重組蛋白）生物(wù)學(xué)活性的方法。《中(zhōng)國(guó)藥典》2015 年版已将報告基因檢測方法列為(wèi)幹擾素活性測定法第二法（通則 3523）。目前在生物(wù)制品 PD1/PD-L1、IL6/IL6R 等相關單抗藥物(wù)的生物(wù)學(xué)活性檢測和 Fc 效應功能(néng)研究中(zhōng)，報告基因檢測法已經起到了至關重要的作(zuò)用(yòng)。以往隻能(néng)采用(yòng)體(tǐ)内動物(wù)學(xué)活性研究的細胞因子如 EPO、GH、FSH、TSH 等，也在逐步采取體(tǐ)外報告基因檢測法替代原有(yǒu)的動物(wù)體(tǐ)内法作(zuò)為(wèi)産(chǎn)品批放行的關鍵指标。轉錄調節與報告基因的表達相結合通常用(yòng)于廣泛的生理(lǐ)學(xué)研究，例如通過量化特定受體(tǐ)反應元件對基因表達的作(zuò)用(yòng)來分(fēn)析受體(tǐ)功能(néng)，或者用(yòng)來進行信号轉導、轉錄因子、蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)相互作(zuò)用(yòng)和病毒感染和傳播的研究，轉錄下遊的事件，如 mRNA 加工(gōng)和蛋白質(zhì)折疊，也可(kě)以被分(fēn)析。因此，熒光素酶被廣泛應用(yòng)于生物(wù)技(jì )術和制藥行業。

概述:

        螢火蟲熒光素酶（Firefly Luciferase）是一種分(fēn)子量為(wèi) 61kDa 的蛋白，因其在宿主細胞中(zhōng)無背景螢光，同時無需翻譯後修飾，檢測快速、可(kě)靠和方便，是應用(yòng)螢火蟲熒光素酶報告基因系統檢測的理(lǐ)想選擇。本試劑盒以 D-熒光素（D-luciferin）為(wèi)底物(wù)，在 ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下，可(kě)以被螢火蟲熒光素酶催化進行氧化脫羧反應，産(chǎn)生激活态的氧化熒光素（Oxyluciferin），并産(chǎn)生生物(wù)螢光（Bioluminescence）（圖 1）。生物(wù)螢光與與熒光素酶的啓動子活性成比例，間接反映了細胞刺激物(wù)的生物(wù)學(xué)活性。

 圖1. 螢火蟲熒光素酶底物(wù)的發光原理(lǐ)

産(chǎn)品規格：

          本試劑盒包裝(zhuāng)規格如下表：

産(chǎn)品特性: 

       Bio-One™ One-Step 螢火蟲熒光素酶分(fēn)析試劑盒具(jù)有(yǒu)操作(zuò)簡便、試劑穩定、一緻性良好、靈敏度高等特點。

       1. 方便：将凍幹粉底物(wù)與緩沖液簡單混合即可(kě)使用(yòng)，樣品檢測步驟簡單；

       2. 快速：熒光素酶檢測 5-30min 内完成；

       3. 更亮更持久的光信号：針對批處理(lǐ)和持續測量進行了優化，延長(cháng)的強光輸出時間有(yǒu)助于增加靈敏度，尤其是延長(cháng)孵化時間的實驗；

       4. 高靈敏度：能(néng)夠檢測最低 10-20mol 的熒光素酶； 

 存儲：

        采用(yòng)冰袋運輸。收到試劑盒後，可(kě)在-30 ~ -15℃長(cháng)期保存，混合後的試劑反複凍融 11 個循環仍可(kě)保持穩定。

        1. 混合前：Bio-One™ One-Step 熒光素酶反應緩沖液可(kě)在室溫保存 90 天(> 90%活性)或在 2 ~ 8℃長(cháng)期保存； 

        2. 混合後：Bio-One™ One-Step 熒光素酶分(fēn)析試劑可(kě)在室溫保存 1 天(> 80%活性)或在 2 ~ 8℃保存 5 天(> 85%活性)。為(wèi)保證試劑出色的使用(yòng)性能(néng)，未使用(yòng)完的試劑建議-70℃保存

        低于-10℃避光保存。為(wèi)保證最佳使用(yòng)性能(néng)，長(cháng)期存儲時，建議置于-70℃保存。