背景：

                   IdeS protease是僅在鉸鏈區(qū)下方的一個特定位點裂解IgG以産(chǎn)生F(ab')2和Fc片段的免疫球蛋白降解酶。由于IdeS protease隻在一個特定位點消化IgG，因此延長(cháng)孵育時間也沒有(yǒu)過度消化的風險。

概述：

       Rhinogen^® IdeS protease是利用(yòng)E. coli表達系統重組表達生産(chǎn)并經過分(fēn)子改造得到的重組IdeS蛋白酶。其含有(yǒu)His标簽，在酶切完成後很(hěn)容易從酶切反應體(tǐ)系中(zhōng)分(fēn)離去除。IdeS蛋白酶在生理(lǐ)反應條件下切割IgG，從而保持免疫反應性。在pH 6.0~8.0範圍的常用(yòng)緩沖液中(zhōng)，IdeS蛋白酶可(kě)有(yǒu)效切割多(duō)種抗體(tǐ)，最适pH6.5，且NaCl濃度不宜過高。經過改造後的IdeS蛋白酶具(jù)有(yǒu)更高的酶活和更廣的底物(wù)特異性，除可(kě)酶切人IgG1~4、猴、綿羊、兔IgG外，還對小(xiǎo)鼠IgG2a、IgG3具(jù)有(yǒu)特異性切割活性。

包裝(zhuāng)規格：

       Rhinogen^® IdeS protease包裝(zhuāng)規格如下：

       QIP-001是凍幹粉制劑産(chǎn)品，制劑緩沖液為(wèi)20mM Tris，50mM NaCl，1mM EDTA，pH 7.5。

産(chǎn)品來源：

       Rhinogen^® IdeS protease是利用(yòng)E. coli表達系統重組表達生産(chǎn)并經過分(fēn)子改造得到的重組IdeS蛋白酶，分(fēn)子量大小(xiǎo)約為(wèi)36kDa。

産(chǎn)品質(zhì)量：

       SDS-PAGE分(fēn)析，純度≥95%。

産(chǎn)品特性：

       最适pH為(wèi)6.0~8.0。

酶活定義：

       1個酶活力單位定義：37°C條件下，30分(fēn)鍾内酶切1μg重組單克隆IgG所需要的酶量。

儲存條件：

       1. 采用(yòng)冰袋或幹冰運輸， 收到産(chǎn)品後請立即将其置于-30℃至 -10℃凍存；

       2. 使用(yòng)前，用(yòng)無菌水溶解IdeS protease凍幹粉末。溶解後，2~8℃存放，若無菌取用(yòng)，有(yǒu)效期為(wèi)30天。

産(chǎn)品特點：

       Rhinogen^® IdeS protease是一種高度純化和非常穩定的重組蛋白酶，具(jù)有(yǒu)穩定性高、比活性高等特點。适用(yòng)于重組抗體(tǐ)藥物(wù)的結構表征分(fēn)析。

       1. 高比活性：有(yǒu)效切割抗體(tǐ)下鉸鏈，獲得F(ab’)2和Fc片段；

       2. 廣泛的底物(wù)特異性：除對人IgG1~4、猴、羊、兔IgG有(yǒu)酶切活力外，還對小(xiǎo)鼠IgG2a、IgG3具(jù)有(yǒu)特異性切割活性；

       3. 無動物(wù)源性：重組生産(chǎn)，無外源性的病毒污染，生産(chǎn)過程不使用(yòng)任何動物(wù)源原料；

       4. 高穩定性：每批産(chǎn)品都經過嚴格的質(zhì)量控制，以實現産(chǎn)品批間穩定性。

應用(yòng)：

       特定位點裂解IgG以産(chǎn)生F(ab’)2和Fc片段。

使用(yòng)建議：

       1、試劑準備：

       1） 使用(yòng)前，請将Rhinogen^® IdeS protease取出，10000rpm離心10秒(miǎo)，确保所有(yǒu)幹粉都在管底；

       2）用(yòng)去離子水将Rhinogen^® IdeS protease幹粉溶解成50units/μl溶液。

       2、推薦使用(yòng)方法：

       1）在消化緩沖液或其他(tā)相容緩沖液中(zhōng)加入所需量的IgG（0.5~10mg/ml）；

       2）将Rhinogen^® IdeS protease加入至IgG樣品中(zhōng)；

       注意：每1μg IgG加1 unit IdeS蛋白酶進行消化；例如，加入1μl（50 units）IdeS溶液以消化50μg的IgG；

       3）在37℃條件下孵育30~60分(fēn)鍾。