背景:
EndoS 是 IgG 特異性糖苷内切酶,可(kě)以水解 IgG Fc 端N-聚糖的兩個N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)中(zhōng)間的 β-1,4 糖苷鍵,釋放糖鏈, 從而在Asn殘基上留下含有(yǒu)或不含核心岩藻糖的GlcNAc。
概述:
Rhinogen® Endoglycosidase, EndoS 是 E.coli 表達系統表達生産(chǎn)并經過多(duō)步層析純化得到的重組糖苷内切酶。對所有(yǒu)類型的N-糖鏈都能(néng)有(yǒu)效酶切。可(kě)做用(yòng)于人 IgG 各亞型,及小(xiǎo)鼠、大鼠、猴、山(shān)羊、綿羊、牛、馬的 IgG 抗體(tǐ)糖基。 本品含有(yǒu) His 标簽,在酶切完成後很(hěn)容易從酶切反應體(tǐ)系中(zhōng)分(fēn)離去除。
酶活定義:
1個酶活力單位定義:在37℃, pH9.0條件下,1分(fēn)鍾内催化生成1μmol AC-Lys-pNA所需的酶量為(wèi)一個活力單位。
産(chǎn)品規格:
Rhinogen® EndoS endoglycosidase包裝(zhuāng)規格如下:
目錄号 | 規格 |
QPF-011-A |
1000U |
QPF-011-B |
5000U |
QPF-011 儲存在緩沖液中(zhōng),以液體(tǐ)的形式提供。緩沖液的組成為(wèi):150 mM NaCl, 20 mM
Tris-HCl, 5 mMEDTA (pH7.5, 25°C)。
産(chǎn)品來源:
Rhinogen® Endoglycosidase, EndoS是利用(yòng)E. coli表達系統表達生産(chǎn)并經過多(duō)步層析純化得到的。重組糖苷内切酶,分(fēn)子量大小(xiǎo)約為(wèi)92kDa。
産(chǎn)品質(zhì)量:
SDS-PAGE分(fēn)析,純度≥95%。
産(chǎn)品特性:
Rhinogen® Endoglycosidase, EndoS 是一種高度純化和非常穩定的重組糖苷酶,具(jù)有(yǒu)穩定性高、比活性高等特點。适用(yòng)于 IgG 蛋白糖基化修飾表征等。
1. 底物(wù)特異性強:隻對天然和完全折疊 IgG 具(jù)有(yǒu)活性;
2. 高 效 性:反應條件溫和(37℃),同時能(néng)快速釋放 N-糖鏈,縮短樣品制備時間;
3. 廣 譜 性:對 IgG Fc 端的 N-連糖鏈能(néng)特異性識别并切除;
4. 高穩定性:每批産(chǎn)品都經過嚴格的質(zhì)量控制,以實現産(chǎn)品批間穩定性。
應用(yòng):
去糖基化以除去 Fc 聚糖異質(zhì)性;抗體(tǐ)糖工(gōng)程改造;IgG 糖型分(fēn)析。
保存條件:
産(chǎn)品采用(yòng)冰袋或幹冰運輸,收到産(chǎn)品後請立即将其置于-20℃以下儲存,有(yǒu)效期一年。用(yòng)去離子水或25mmol/L Tris-HCl (pH8.5)溶解後于2~8℃可(kě)以保存7天。建議用(yòng)25mmol/L Tris-HCl (pH8.5)稀釋至所需濃度後分(fēn)裝(zhuāng),-20℃保存6個月 内使用(yòng),溶解後避免反複凍融。