背景：

O-糖蛋白酶是一組種類不斷增加的高度特異性的内切蛋白酶，可(kě)識别并切割糖肽/糖蛋白上，與 O-糖基化絲氨酸或蘇氨酸相鄰的位置。對 O-糖蛋白酶酶切産(chǎn)生的糖肽進行 MS 分(fēn)析，可(kě)提供有(yǒu)關蛋白序列中(zhōng) O-糖基化位點和每個糖基化位點上連接的 O-糖鏈結構的重要信息。

包裝(zhuāng)規格：

Rhinogen^® O-GlyCORTARprotease包裝(zhuāng)規格如下：

酶活定義：

在50mM Tris-HCl，150mM NaCl，pH為(wèi)7.6條件下，37℃反應30分(fēn)鍾，1單位酶（1U）可(kě)消化30µg依那西普 ≥ 95%，通過SDS-PAGE确認。

儲存條件：

采用(yòng)冰袋運輸，收到産(chǎn)品後請置于2~8℃保存，請勿凍存。

産(chǎn)品特性：

1. 高純度：純度 ≥ 90%；

2. 高特異性：隻能(néng)消化攜帶粘蛋白型O-聚糖的蛋白質(zhì)，包括唾液酸化底物(wù)、糖基化 Ser 和Thr 殘基的 N 末端；

3. 适用(yòng)性廣：接受多(duō)種 O-聚糖結構，包括唾液酸化的糖基化核心 1 和核心 2 結構以及 Tn 抗原；

4. 無動物(wù)源性：重組生産(chǎn)，無外源性的病毒污染，生産(chǎn)過程不使用(yòng)任何動物(wù)源原料。

産(chǎn)品應用(yòng)：

  1. O-糖基化分(fēn)析；

  2. O-聚糖位點測定。

酶切原理(lǐ)：

圖1. 原理(lǐ)圖

抗體(tǐ)消化：

1. 按1U Rhinogen® O-GlyCORTAR protease /1μg糖蛋白的比例進行消化；

2. 在50mM Tris-HCl，150mM NaCl，pH為(wèi)7.6，37℃條件下反應2小(xiǎo)時。

使用(yòng)注意事項：

1. 對于複雜的底物(wù)，孵育時間可(kě)延長(cháng)至過夜，根據具(jù)體(tǐ)情況進行優化；

2. 反應體(tǐ)系中(zhōng)适宜的糖蛋白最終濃度為(wèi)0.1-10 mg/ml；

3. 本産(chǎn)品僅供研究使用(yòng)，不适用(yòng)于人或動的物(wù)診斷及治療用(yòng)途。