背景：

       Rhinogen^® IdeS protease是利用(yòng)E. coli表達系統重組表達生産(chǎn)并經過分(fēn)子改造得到的重組IdeS蛋白酶，分(fēn)子量大小(xiǎo)約為(wèi)36kDa。其僅在鉸鏈區(qū)下方的一個特定位點裂解IgG以産(chǎn)生F(ab')2和Fc片段。且在生理(lǐ)條件下切割IgG，從而保持免疫原性。在pH 6.0~8.0範圍的常用(yòng)緩沖液中(zhōng)，IdeS蛋白酶可(kě)有(yǒu)效切割多(duō)種抗體(tǐ)。經過改造後的IdeS蛋白酶具(jù)有(yǒu)更高的酶活和更廣的底物(wù)特異性，除可(kě)酶切人IgG1~4（切割位點如下表1）、猴、羊、兔IgG外，還對小(xiǎo)鼠IgG2a、IgG3具(jù)有(yǒu)特異性切割活性。

       Rhinogen^® Immobilized IdeS，Microspin是一種将Rhinogen^® IdeS protease共價偶聯到瓊脂糖珠的樹脂，可(kě)在特定位點裂解IgG以産(chǎn)生F(ab')2和Fc片段。消化完成後的溶液内，可(kě)得到F(ab')2和Fc片段，而不含IdeS酶。

包裝(zhuāng)規格：

       Rhinogen^® Immobilized IdeS，Microspin包裝(zhuāng)規格如下：

       一支Immobilized IdeS，Microspin可(kě)用(yòng)于消化0.5mg IgG。
       産(chǎn)品儲存于20%乙醇中(zhōng)，不添加防腐劑。

儲存條件：

       采用(yòng)冰袋運輸，Immobilized IdeS，Microspin産(chǎn)品儲存于20％乙醇中(zhōng)，收到産(chǎn)品後請立即将其置于2-8℃保存。避免凍存！

産(chǎn)品特點：

       Rhinogen^® Immobilized IdeS，Microspin具(jù)有(yǒu)如下特性：

       1. 使用(yòng)方便：消化完成後，通過離心即可(kě)分(fēn)離得到消化産(chǎn)物(wù)；

       2. 回收率高：F(ab')2回收率＞85%以上；

       3. 穩定性高：每批産(chǎn)品都經過嚴格的質(zhì)量控制，以實現産(chǎn)品批間穩定性。 

應用(yòng)：

       重組抗體(tǐ)藥物(wù)的結構表征分(fēn)析。

操作(zuò)說明：

       1. Rhinogen^® Immobolized IdeS，Microspin能(néng)有(yǒu)效地用(yòng)于酶切人類、人源化、嵌合、羊、兔和猴的IgG，并對小(xiǎo)鼠IgG2a和IgG3也具(jù)有(yǒu)中(zhōng)等活性。同時也适用(yòng)于許多(duō)Fc-融合蛋白以及抗體(tǐ)藥物(wù)綴合物(wù)（antibody drug conjugates，ADCs）的酶切；不适用(yòng)于小(xiǎo)鼠IgG1/IgG2b、大鼠、豬、牛或山(shān)羊IgG。此外，它不能(néng)切割非IgG同種型，包括IgA、IgM、IgD和IgE；
       2. 對于小(xiǎo)鼠IgG2a和小(xiǎo)鼠IgG3的切割，建議适度提高孵育溫度（酶切溫度越接近37℃，則酶活越高）及孵育時間（2小(xiǎo)時至過夜）；
       3. 理(lǐ)想的IgG濃度應在0.5-20mg/ml的範圍内；
       4. 通過SDS-PAGE很(hěn)容易确定IgG的切割；
       5. 将消化産(chǎn)物(wù)與protein A磁珠孵育30~60分(fēn)鍾後，可(kě)以獲得純化的F(ab’)2片段；另瑞安(ān)生物(wù)可(kě)提供産(chǎn)品 Rhinogen^® Immobolized IdeS Cut-Pure Kit，Microspin（貨号：QIP-102），内包含Immobilized IdeS，Microspin及Protein A純化柱；
       6. 最适的酶切反應緩沖液pH為(wèi)6.0~8.0，在低于pH5.0體(tǐ)系中(zhōng)，IdeS 固定化酶會不可(kě)逆的失活，在高于pH8.0體(tǐ)系中(zhōng)需要适當延長(cháng)/優化反應條件；
       7. 本産(chǎn)品僅供研究使用(yòng)，不适用(yòng)于人或動物(wù)的診斷及治療用(yòng)途。