背景:
胰蛋白酶(Trypsin)屬于絲氨酸蛋白酶家族,能(néng)特異性切割多(duō)肽鏈中(zhōng)賴氨酸和精(jīng)氨酸殘基中(zhōng)的羧基。胰蛋白酶原由胰腺分(fēn)泌,受腸激酶或胰蛋白酶的限制分(fēn)解成為(wèi)活化胰蛋白酶,是肽鏈内切酶。它不僅起消化酶的作(zuò)用(yòng),而且還能(néng)限制分(fēn)解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前體(tǐ),起活化作(zuò)用(yòng),是特異性最強的蛋白酶。
産(chǎn)品包裝(zhuāng):
Rhinogen® QuickTM Trypsin(Sequencing Grade)包裝(zhuāng)規格如下:
目錄号 |
規格 |
QIP-012-A |
20μg |
配套試劑:
試劑 | 目錄号 | 規格 |
QuickTM反應增強劑 | EB17-A | 3×1 vial,0.5mg/vial |
Quick™ Trypsin酶及QuickTM反應增強劑以凍幹粉形式提供。
産(chǎn)品來源:
Rhinogen® QuickTM Trypsin(Sequencing Grade)是利用(yòng)重組大腸杆菌系統表達生;産(chǎn)并經過多(duō)步層析純化得到的重組胰蛋白酶,其氨基酸序列與豬源胰蛋白酶序列同源,分(fēn)子量大小(xiǎo)約為(wèi)25kDa。
産(chǎn)品質(zhì)量:
SDS-PAGE分(fēn)析,純度≥95%;沒有(yǒu)檢測到污染的蛋白酶活性。
産(chǎn)品特性:
最适反應pH:7.0~8.0。
保藏條件:
采用(yòng)冰袋運輸。收到産(chǎn)品後請立即将置于-20℃,密封防潮。酶溶解後,-70℃存放;若溶解後存于2-8℃,需在24hr内使用(yòng)完畢;QuickTM 反應增強劑凍幹粉溶解後,-70℃可(kě)儲存一個月,2-8℃可(kě)儲存一周。酶液及QuickTM 反應增強劑溶解後避免室溫下長(cháng)時間放置,可(kě)進行分(fēn)裝(zhuāng),避免反複凍融。
應用(yòng):
1. 在數分(fēn)鍾内完成抗體(tǐ)或蛋白的完全快速消化;
2. 肽譜圖、肽指紋譜或蛋白序列分(fēn)析;
3. 蛋白質(zhì)組學(xué)研究;
4. 增加蛋白質(zhì)序列覆蓋率;
5. 改善溶液内酶解方案。
産(chǎn)品特點:
Rhinogen® QuickTM Trypsin(Sequencing Grade)是一種高度純化和非常穩定的重組蛋白酶,具(jù)有(yǒu)穩定性高、比活性高等特點。适用(yòng)于蛋白質(zhì)組學(xué)研究中(zhōng)肽譜圖、肽指紋譜或蛋白序列分(fēn)析。
1. 高純度:SDS-PAGE分(fēn)析,純度≥95%;
2. 高一緻性:每批産(chǎn)品都經過嚴格的質(zhì)量控制,以實現産(chǎn)品批間穩定性;
3. 不自切:重組甲基化修飾突變胰蛋白酶,不自切;
4.無動物(wù)源性:重組生産(chǎn),無外源性的病毒污染,生産(chǎn)過程不使用(yòng)任何動物(wù)源原料;
5. 超高效率:可(kě)顯著縮短蛋白質(zhì)酶解時間,在同一天内完成所有(yǒu)酶解工(gōng)作(zuò),兼容液相色譜(LC)和MS分(fēn)析。
操作(zuò)說明:
1. 胰蛋白酶的使用(yòng)量為(wèi)胰蛋白酶:目的蛋白=1:20~1:100(w/w),最适pH為(wèi)7.0~8.0;
2. 反應體(tǐ)積可(kě)以按比例放大或縮小(xiǎo);
3. 在酶切反應體(tǐ)系中(zhōng)添加1mM CaCl2,可(kě)以提高胰蛋白酶的活性;
4. 反應結束後,取少部分(fēn)反應體(tǐ)系進行SDS-PAGE或者RP-HPLC檢測,确認酶切效果。剩餘反應體(tǐ)系置于冰浴或者凍存。若酶切不完全,則取出反應體(tǐ)系,置于37℃繼續進行反應;
5. 對于不同的蛋白樣品,需要實驗摸索最适的酶濃度及反應時間。可(kě)用(yòng)50mM NH4HCO3或者pH7.0-8.0的緩沖溶液進行酶液稀釋;
6. 本産(chǎn)品僅供研究使用(yòng),不适用(yòng)于人或動物(wù)的診斷及治療用(yòng)途。