背景:
柔性鏈接(Flexible linker)在融合蛋白中(zhōng)起着重要的作(zuò)用(yòng)。融合蛋白是由不同蛋白質(zhì)結構域(functional domain)通過柔性鏈接區(qū)域連接在一起的蛋白質(zhì)。柔性鏈接區(qū)域通常包含了一段較長(cháng)、高度可(kě)變的氨基酸序列。柔性鏈接在融合蛋白中(zhōng)起到橋梁和調節作(zuò)用(yòng),使不同結構域的蛋白質(zhì)能(néng)夠協同工(gōng)作(zuò),并具(jù)備更多(duō)功能(néng)多(duō)樣性和适應性。作(zuò)為(wèi)融合蛋白重組不可(kě)或缺的組成部分(fēn),連接子在構建穩定、具(jù)有(yǒu)生物(wù)活性的融合蛋白中(zhōng)發揮着重要的作(zuò)用(yòng)。
在重組蛋白藥物(wù)的設計和開發中(zhōng),柔性鏈接區(qū)域的選擇和優化是一個重要的策略,可(kě)以幫助實現藥物(wù)的最佳效果。通過合理(lǐ)設計柔性鏈接區(qū)域,可(kě)以改善重組蛋白藥物(wù)的效力、穩定性和藥理(lǐ)特性,為(wèi)疾病治療提供更好的選擇。
包裝(zhuāng)規格:
Rhinogen® GlyCOUPER protease包裝(zhuāng)規格如下:
目錄号
規格
QIP-010-A
2000U
産(chǎn)品質(zhì)量:
SDS-PAGE分(fēn)析,純度≥95%。
酶活定義:
在50mM Tris-HCl,150mM NaCl,pH為(wèi)7.6條件下,37℃孵育15分(fēn)鍾,1單位酶(1U)可(kě)消化1µg杜拉魯肽 ≥ 95%,通過SDS-PAGE确認。
儲存條件:
采用(yòng)冰袋運輸,收到産(chǎn)品後請置于2~8℃保存,請勿凍存。
産(chǎn)品特性:
1. 高純度:純度 ≥ 95%;
2. 不自切:對複雜融合蛋白可(kě)進行可(kě)靠且重複的消化,穩定不自切;
3. 高特異性:特異性消化具(jù)有(yǒu)柔性連接體(tǐ)的融合蛋白;
4. 高穩定性:每批産(chǎn)品都經過嚴格的質(zhì)量控制,以實現産(chǎn)品批間穩定性;
5. 無動物(wù)源性:重組生産(chǎn),無外源性的病毒污染,生産(chǎn)過程不使用(yòng)任何動物(wù)源原料。
産(chǎn)品應用(yòng):
可(kě)用(yòng)于消化由甘氨酸或甘氨酸和絲氨酸殘基、重複序列組成的柔性連接子。
酶切原理(lǐ):
圖1. 原理(lǐ)圖
抗體(tǐ)消化:
1. 按1U GlyCOUPERprotease /1μg融合蛋白的比例進行消化;
2. 37℃條件下反應1小(xiǎo)時。
使用(yòng)注意事項:
1. 根據底物(wù)的不同,可(kě)能(néng)需要優化酶的用(yòng)量和消化時間;
2. 在 pH 值為(wèi) 7.6 時可(kě)達到最佳活性,在 pH值為(wèi) 6.5-9 時具(jù)有(yǒu)活性,但不同的 GS 連接蛋白的消化效率可(kě)能(néng)不同;
3. 在消化緩沖液(50 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl)中(zhōng)制備融合蛋白,消化反應中(zhōng)蛋白質(zhì)的最終濃度應為(wèi) 1-5 mg/ml;
4. 本品僅用(yòng)于科(kē)學(xué)研究,不得用(yòng)于臨床診斷和治療。