背景：

       抗體(tǐ)依賴的細胞介導的細胞毒性作(zuò)用(yòng)（Antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity, ADCC）是免疫系統對抗病毒感染及腫瘤疾病的一種重要免疫防禦機制。抗體(tǐ)通過與靶細胞表面抗原特異性結合，招募如自然殺傷（Natural killer, NK）細胞等效應細胞殺死靶細胞。NK細胞表面表達FcγRIIIa蛋白，是一種抗體(tǐ)Fc區(qū)域的受體(tǐ)，能(néng)識别并結合抗體(tǐ)的Fc端，從而使NK細胞結合到靶細胞周圍。一旦Fc受體(tǐ)與抗體(tǐ)的Fc區(qū)域結合，NK細胞就會釋放細胞因子和細胞毒性顆粒，進入靶細胞觸發細胞凋亡。傳統的ADCC檢測方法是利用(yòng)外周血單核細胞（Peripheral blood mononuclear cells, PBMCs）或者從其中(zhōng)分(fēn)離得到NK細胞作(zuò)為(wèi)效應細胞進行檢測，該方法的效應細胞較難獲取，且方法變異性大、操作(zuò)繁瑣。

       Rhinogen^®ADCC Reporter Bioassay, Complete Kit (BT474) 報告基因檢測系統包含抗Her2抗體(tǐ)ADCC功能(néng)檢測所需的靶細胞BT474細胞及抗Her2抗體(tǐ)對照品。如果您的待測抗體(tǐ)能(néng)識别BT474細胞上的不同表面抗原，該試劑盒仍舊适用(yòng)于您抗體(tǐ)的ADCC活性檢測。

       Rhinogen^®ADCC Reporter Bioassay是一種生物(wù)發光報告基因檢測方法，用(yòng)于檢測抗體(tǐ)的ADCC生物(wù)學(xué)活性。其作(zuò)用(yòng)機理(lǐ)基于NFAT（Nuclear factor of activated T-cells）反應通路（圖1）。本系統采用(yòng)基因工(gōng)程改造的Jurkat細胞作(zuò)為(wèi)效應細胞，該細胞穩定表達FcγRIIIa受體(tǐ)（V158高親和力突變體(tǐ)）和由NFAT應答(dá)元件驅動表達的螢火蟲螢光素酶。抗體(tǐ)通過與效應細胞表面FcγRIIIa的結合，激發細胞内NFAT反應元件，NFAT反應元件則驅動螢火蟲熒光素酶的表達。熒光素酶活性通過生物(wù)發光進行定量。

圖1.Rhinogen^® ADCC Reporter Bioassay原理(lǐ)圖

産(chǎn)品規格:

特點：

       Rhinogen^®ADCC報告基因檢測系統提供的ADCC生物(wù)學(xué)活性檢測方法操作(zuò)具(jù)有(yǒu)操作(zuò)簡便（圖2）、變異性低、靈敏度高等特點，并可(kě)與多(duō)種不同的靶細胞搭配使用(yòng)。

       1. 原理(lǐ)明确：基于抗體(tǐ)結合細胞對效應細胞FcγRIIIa受體(tǐ)信号通路的激活；

       2. 應用(yòng)廣泛：治療性抗體(tǐ)藥物(wù)的Fc功能(néng)學(xué)研究和産(chǎn)品質(zhì)控、ADCC作(zuò)用(yòng)機制研究；

       3. 操作(zuò)簡便：檢測過程簡單，檢測試劑易用(yòng)；

       4. 适用(yòng)性廣：該系統已完成針對懸浮或貼壁的多(duō)種靶細胞的适用(yòng)性驗證，效果良好；

       5. 靈敏度高：可(kě)靈敏的檢測到抗體(tǐ)糖型的改變；

       6. 穩定性好：傳代30次仍可(kě)穩定靈敏檢測，數據重複性好。

       Rhinogen^®ADCC報告基因檢測系統的各項特性使得其可(kě)作(zuò)為(wèi)抗體(tǐ)篩選、抗體(tǐ)糖基化修飾等研究的有(yǒu)效手段。同時，該法可(kě)作(zuò)為(wèi)抗體(tǐ)藥物(wù)ADCC活性的常規檢測方法及批簽發檢測指标。

圖2. Rhinogen^® ADCC Reporter Bioassay檢測流程圖

運輸及存儲：

       運輸方式：幹冰運輸

       儲       存：收到細胞後，請立即将ADCC Bioassay效應細胞及BT474靶細胞凍存管轉移至-140°C以下的保存條件長(cháng)期保存。抗Her2抗體(tǐ)請保存在-20℃。