背景:
羧肽酶B又(yòu)稱為(wèi)肽酰-L-賴氨酸(L-精(jīng)氨酸)水解酶,屬于金屬羧肽酶A和羧肽酶B(CPA/CPB)家族,每分(fēn)子含有(yǒu)一個Zn原子,可(kě)選擇性水解蛋白或多(duō)肽羧基端的精(jīng)氨酸和賴氨酸。活性受精(jīng)氨酸、賴氨酸的競争性抑制,金屬離子螯合劑如EDTA等抑制酶活。
Rhinogen® Carboxypeptidase B與大鼠胰腺羧肽酶B氨基酸序列完全一緻,經過大腸杆菌系統重組表達生産(chǎn)并經過層析純化得到的重組羧肽酶B。分(fēn)子量為(wèi)33.8kD,等電(diàn)點為(wèi)6.0,最适pH為(wèi)7.0-9.0。在25℃-37℃範圍下具(jù)有(yǒu)較好的酶切活性,在低溫下适當延長(cháng)反應時間也可(kě)以進行消化。
産(chǎn)品來源:
Rhinogen® Carboxypeptidase B是利用(yòng)重組E. coli表達系統表達來源于大鼠胰腺的重組羧肽酶B,經過層析純化得到的重組羧肽酶B,分(fēn)子量大小(xiǎo)約為(wèi)33.8kDa。
包裝(zhuāng)規格:
Rhinogen® Carboxypeptidase B 包裝(zhuāng)規格如下:
QIP-006是以凍幹粉形式提供。
目錄号
規格
QIP-006-A
1mg
QIP-006-B
5×1mg
産(chǎn)品質(zhì)量:
純度:SDS-PAGE單一主條帶,HPLC≥95%。
産(chǎn)品特性:
最适pH為(wèi)7.0-9.0。
儲存條件:
1. 凍幹粉采用(yòng)冰袋運輸, 收到産(chǎn)品後請立即将其置于-20℃儲存,24個月穩定;
2. 使用(yòng)前用(yòng)無菌水或者10mM Tris-HCl (pH7.5)溶解Carboxypeptidase B凍幹粉末,使酶液濃度為(wèi)1-10mg/ml。溶解後,-20℃存放,避免反複凍融。
産(chǎn)品特點:
Rhinogen® Carboxypeptidase B是一種高度純化和非常穩定的重組蛋白酶,具(jù)有(yǒu)穩定性高、比活性高等特點。适用(yòng)于蛋白質(zhì)C端j堿性氨基酸測定和抗體(tǐ)堿性峰的檢測。
1. 高純度:比活高;宿主蛋白殘留小(xiǎo)于生物(wù)制品限度要求,純度≥95%;
2. 無動物(wù)源性:重組生産(chǎn),無外源性的病毒污染,生産(chǎn)過程不使用(yòng)任何動物(wù)源原料;
3. 高穩定性:每批産(chǎn)品都經過嚴格的質(zhì)量控制,以實現産(chǎn)品批間穩定性;
4. 凍幹粉:易于儲存和運輸;
應 用(yòng):
1.蛋白質(zhì)C-末端堿性氨基酸如精(jīng)氨酸、賴氨酸和組氨酸的測定;
2.重組胰島素及其類似物(wù)的生産(chǎn);
3.重組抗體(tǐ)的質(zhì)量檢測;
4.其它重組多(duō)肽類物(wù)質(zhì)的生産(chǎn);
5.某些特殊化合物(wù)的酶促合成。
使用(yòng)建議:
1、試劑準備:
1)使用(yòng)前,請将Rhinogen® Carboxypeptidase B取出,10000rpm離心10秒(miǎo),确保所有(yǒu)幹粉都在管底;用(yòng)去離子水或者10mM Tris-HCl (pH7.5)溶解凍幹粉末,使酶液濃度為(wèi)1-10mg/ml。
2、推薦使用(yòng)方法:
2、Carboxypeptidase B蛋白的推薦使用(yòng)量為(wèi),酶量:目的蛋白(質(zhì)量比)=1:50~1:1000(w/w),最适pH為(wèi)7.5-9.0,25℃-37℃酶切。
注意:
1)對于不同的蛋白樣品,需要實驗摸索最适的酶濃度及反應時間。
2)25℃-37℃反應,使用(yòng)25℃消化時可(kě)以适當延長(cháng)反應時間。
3)最适的酶切反應緩沖液pH為(wèi)7.5-9.0,pH≥12時,活性則完全喪失。
操作(zuò)說明:
本産(chǎn)品僅供研究使用(yòng),不适用(yòng)于人或動物(wù)的診斷及治療用(yòng)途。