背景：

       蛋白内切酶Glu-C(又(yòu)稱V8蛋白酶、谷氨酰胺内切酶、天冬酰胺内切酶、金黃色葡萄菌V8蛋白酶)屬于絲氨酸蛋白酶家族，能(néng)特異水解谷氨酸(Glu)或天冬氨酸(Asp)殘基羧基端肽鍵。其特異性受緩沖液組分(fēn)直接影響，在pH7.8的NH4HCO3和pH4.0的CH3COONH4緩沖液中(zhōng)識别并切割Glu羧基端肽鍵，在pH7.8的磷酸鹽緩沖液中(zhōng)識别并切割Glu或Asp羧基端肽鍵，且對Glu的水解速率高于Asp。

       Rhinogen^® Glu-C (Sequencing Grade)是利用(yòng)重組大腸杆菌系統表達并經過多(duō)步層析純化得到的重組蛋白酶，分(fēn)子量大小(xiǎo)約為(wèi)24kD，可(kě)以單獨使用(yòng)或與其它蛋白酶搭配用(yòng)于蛋白質(zhì)酶切測序、肽圖譜分(fēn)析和肽指紋圖譜分(fēn)析。其在pH4.0-9.0之間均有(yǒu)活性，最适pH為(wèi)8.0-8.5。V8蛋白酶的抑制劑有(yǒu)二異丙基氟磷酸（DFP）、α2-巨球蛋白和Nα-P-甲苯磺酰基-L-賴氨酸氯甲基酮（TLCK）。

包裝(zhuāng)規格：

       Rhinogen^® Trypsin (Sequencing Grade)包裝(zhuāng)規格如下：

       QIP-005是以凍幹粉形式提供。

産(chǎn)品來源：

       Rhinogen^® Glu-C (Sequencing Grade)是利用(yòng)重組大腸杆菌系統表達生産(chǎn)并經過多(duō)步層析純化得到的重組蛋白酶，分(fēn)子量大小(xiǎo)約為(wèi)24kDa。

産(chǎn)品質(zhì)量：

       SDS-PAGE分(fēn)析，純度≥95%；沒有(yǒu)檢測到污染的蛋白酶活性。

産(chǎn)品特性：

       在pH4.0-9.0之間均有(yǒu)活性，最适pH為(wèi)8.0-8.5。

儲存條件：

       1.采用(yòng)冰袋運輸，收到産(chǎn)品後請立即将酶置于-20℃，密封防潮。

       2.使用(yòng)水或50mM pH8.0Tris-HCl溶解成0.5mg/ml後，存于-20℃以下，6個月穩定；存于2-8℃（無菌），2個月穩定；25℃或37℃條件下12h，活性可(kě)維持85%以上；避免室溫下長(cháng)時間放置，建議分(fēn)裝(zhuāng)儲存，避免多(duō)次反複凍融。

産(chǎn)品特點：

       Rhinogen^® Glu-C (Sequencing Grade)是一種高度純化和非常穩定的重組蛋白酶，具(jù)有(yǒu)穩定性高、比活性高等特點。适用(yòng)于蛋白質(zhì)組學(xué)研究中(zhōng)肽譜圖、肽指紋譜或蛋白序列分(fēn)析。

       1. 高純度：沒有(yǒu)污染蛋白酶，純度≥95％；

       2. 高穩定性：每批産(chǎn)品都經過嚴格的質(zhì)量控制，以實現産(chǎn)品批間穩定性；

       3. 無動物(wù)源性：重組生産(chǎn)，無外源性的病毒污染，生産(chǎn)過程不使用(yòng)任任何動物(wù)源原料。

應用(yòng)：

       1. 肽譜圖、肽指紋譜或蛋白序列分(fēn)析；

       2. 蛋白質(zhì)組學(xué)研究。

使用(yòng)建議：

       1、試劑準備：

       1）使用(yòng)水或50mM pH8.0 Tris-HCl溶解幹粉，得到濃度為(wèi)0.5mg/ml-1mg/ml的Glu-C溶液。溶解後建議根據單次使用(yòng)量進行分(fēn)裝(zhuāng)，最大限度避免污染或自切。

       2、推薦使用(yòng)方法：

       1） 目的蛋白溶解：用(yòng)酶切緩沖液（如采用(yòng)25-50mM pH7.8 NH₄HCO₃緩沖液）溶解目的蛋白，若目的蛋白溶解度低，可(kě)以考慮對目的蛋白進行變性處理(lǐ)（如添加尿素、SDS、DTT或加熱）。尿素和SDS對Glu-C蛋白酶的影響見下表：

       2）目的蛋白酶切：Glu-C蛋白酶的使用(yòng)量推薦為(wèi)，Glu-C蛋白酶：目的蛋白=1:20-1:100(w/w) ，最适pH為(wèi)8.0-8.5，25℃或37℃酶切2-18hr。

       注意：對于不同的蛋白樣品，需要實驗摸索最适的酶濃度及反應時間。

操作(zuò)說明：

       本産(chǎn)品僅供研究使用(yòng)，不适用(yòng)于人或動物(wù)的診斷及治療用(yòng)途。