背景：

       糜蛋白酶（chymotrypsin）也叫胰凝乳蛋白酶，屬于絲氨酸蛋白酶家族，能(néng)專一性水解芳香族氨基酸羧基形成的肽鍵。糜蛋白酶原由胰腺分(fēn)泌，随胰液進入小(xiǎo)腸後，在Arg 15 和Ile 16之間（按Bovine chymotrypsin A 序列編号）被胰蛋白酶切為(wèi)通過二硫鍵連接的兩部分(fēn)，随後糜蛋白酶在Leu 13 酶切去短肽Ser 14-Arg 15，在Tyr 146 和Asn 148 酶切去短肽Tyr 147-Asn 148，形成由二硫鍵相連的三條肽鏈并具(jù)有(yǒu)生物(wù)活性。

       Rhinogen^® Chymotrypsin (Sequencing Grade)是利用(yòng)重組畢赤酵母系統重組表達并經過多(duō)步層析純化得到重組糜蛋白酶原，通過激活（胰蛋白酶和自身水解）後獲得的活性糜蛋白酶，純度≥95%，如下圖。其氨基酸序列與人源糜蛋白酶序列完全一緻，分(fēn)子量大小(xiǎo)約為(wèi)25kDa。可(kě)選擇性水解芳香族氨基酸如：酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸的C 端形成的肽鍵，也可(kě)以較慢的速率緩慢水解由亮氨酸和蛋氨酸形成的肽鍵，還可(kě)作(zuò)用(yòng)于敏感氨基酸形成的酯。

包裝(zhuāng)規格：

       Rhinogen^® Chymotrypsin (Sequencing Grade)包裝(zhuāng)規格如下：

       QIP-002是以凍幹粉形式提供。

産(chǎn)品來源：

       Rhinogen^® Endoproteinase Lys-C是利用(yòng)重組E. coli表達系統表達的重組賴氨酰内切酶，分(fēn)子量大小(xiǎo)約31±3.1kD。

産(chǎn)品質(zhì)量：

       最适pH為(wèi)7.0-9.5。

儲存條件：

       1. 采用(yòng)藍冰保溫運輸，收到産(chǎn)品後請立即将酶置于-20℃，密封防潮。

       2. 使用(yòng)50mM HAc溶解後，2-8℃存放，2天内使用(yòng)；或溶液分(fēn)裝(zhuāng)後存于-20℃以下，有(yǒu)效期24個月。避免室溫下長(cháng)時間放置，避免反複凍融。

産(chǎn)品特點：

       Rhinogen^® Chymotrypsin (Sequencing Grade)是一種高度純化和非常穩定的重組蛋白酶，具(jù)有(yǒu)穩定性高、比活性高等特點。适用(yòng)于蛋白質(zhì)組學(xué)研究中(zhōng)肽譜圖、肽指紋譜或蛋白序列分(fēn)析。

       1. 高純度：宿主蛋白殘留小(xiǎo)于生物(wù)制品限度要求，純度≥95％；

       2. 無動物(wù)源性：重組生産(chǎn)，無外源性的病毒污染，生産(chǎn)過程不使用(yòng)任何動物(wù)源原料； 

       3. 高穩定性：每批産(chǎn)品都經過嚴格的質(zhì)量控制，以實現産(chǎn)品批間穩定性；

       4. 高比活性：比活（單位/mg）≥2000USP units/mg。

應   用(yòng)：

       1. 蛋白質(zhì)組學(xué)研究；

       2. 肽譜圖、肽指紋譜或蛋白序列分(fēn)析。

使用(yòng)建議：

       1、試劑準備：

       1）使用(yòng)前，請将Rhinogen^®  Endoproteinase Lys-C取出，10000rpm離心10秒(miǎo)，确保所有(yǒu)幹粉都在管底；

       2）用(yòng)50mM HAc 将Rhinogen^® Chymotrypsin (Sequencing Grade)幹粉溶解成1-10mg/ml溶液。

       2、推薦使用(yòng)方法：

       在蛋白消化中(zhōng)，用(yòng)50mM 或100mM 的NH4HCO3 溶解目的蛋白，然後加入一定量的酶溶液，使酶量：目的蛋白（質(zhì)量比）=1：50。最适反應溫度為(wèi)30℃，溫度超過37℃後酶會發生自切。

       注意：對于不同的蛋白樣品，需要實驗摸索最适的酶濃度及反應時間。

操作(zuò)說明：

       本産(chǎn)品僅供研究使用(yòng)，不适用(yòng)于人或動的物(wù)診斷及治療用(yòng)途。