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IdeS protease
  1. 貨号
  2. 規格
  3. 價格
QIP-001-A
5000U
詢價
QIP-001-B
5×5000U
詢價
QIP-001-C
1000U
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産(chǎn)品概述

背景:

       IdeS僅在鉸鏈區(qū)下方的一個特定位點裂解IgG以産(chǎn)生F(ab')2和Fc片段的免疫球蛋白降解酶。Rhinogen® IdeS protease是利用(yòng)E.coli系統重組表達生産(chǎn),并經過分(fēn)子改造得到的重組IdeS蛋白。其含有(yǒu)His标簽,在酶切完成後很(hěn)容易從酶切反應體(tǐ)系中(zhōng)分(fēn)離去除。IdeS蛋白酶在生理(lǐ)條件下切割IgG,從而保持免疫反應性。在pH 6.0~8.0範圍的常用(yòng)緩沖液中(zhōng),IdeS蛋白酶可(kě)有(yǒu)效切割多(duō)種抗體(tǐ)。經過改造後的IdeS蛋白酶具(jù)有(yǒu)更高的酶活和更廣的底物(wù)特異性,除可(kě)酶切人IgG1~4、猴、羊、兔IgG外,還對小(xiǎo)鼠IgG2a、IgG3具(jù)有(yǒu)特異性切割活性。

包裝(zhuāng)規格:

       Rhinogen® IdeS protease包裝(zhuāng)規格如下:

目錄号
規格
QIP-001-A
5000U
QIP-001-B
5×5000U
QIP-001-C
1000U
       QIP-001是凍幹粉制劑産(chǎn)品,制劑緩沖液為(wèi)20mM Tris50mM NaCl1mM EDTApH 7.5

産(chǎn)品來源:

       Rhinogen® IdeS protease是利用(yòng)E. coli表達系統重組表達生産(chǎn)并經過分(fēn)子改造得到的重組IdeS蛋白酶,分(fēn)子量大小(xiǎo)約為(wèi)36kDa

産(chǎn)品質(zhì)量:

       SDS-PAGE分(fēn)析,純度≥95%。

産(chǎn)品特性:

       最适pH為(wèi)6.0~8.0。

酶活定義:

       1個酶活力單位定義:37°C條件下,30分(fēn)鍾内酶切1μg重組單克隆IgG所需要的酶量。

儲存條件:

       1. 采用(yòng)冰袋或幹冰運輸, 收到産(chǎn)品後請立即将其置于-30℃至 -10℃凍存;

       2. 使用(yòng)前,用(yòng)無菌水溶解IdeS protease凍幹粉末。溶解後,2~8℃存放,若無菌取用(yòng),有(yǒu)效期為(wèi)30天。

産(chǎn)品特點:

       Rhinogen® IdeS protease是一種高度純化和非常穩定的重組蛋白酶,具(jù)有(yǒu)穩定性高、比活性高等特點。适用(yòng)于重組抗體(tǐ)藥物(wù)的結構表征分(fēn)析。

       1. 高比活性有(yǒu)效切割抗體(tǐ)下鉸鏈,獲得F(ab’)2Fc片段;

       2. 廣泛的底物(wù)特異性:除對人IgG1~4、猴、羊、兔IgG有(yǒu)酶切活力外,還對小(xiǎo)鼠IgG2aIgG3具(jù)有(yǒu)特異性切割活性;

       3. 無動物(wù)源性:重組生産(chǎn),無外源性的病毒污染,生産(chǎn)過程不使用(yòng)任何動物(wù)源原料;

       4. 高穩定性:每批産(chǎn)品都經過嚴格的質(zhì)量控制,以實現産(chǎn)品批間穩定性。

應用(yòng):

       特定位點裂解IgG以産(chǎn)生F(ab’)2Fc片段。

使用(yòng)建議:

       1、試劑準備:

       1) 使用(yòng)前,請将Rhinogen® IdeS protease取出,10000rpm離心10秒(miǎo),确保所有(yǒu)幹粉都在管底;

       2)用(yòng)去離子水将Rhinogen® IdeS protease幹粉溶解成50units/μl溶液。

       2、推薦使用(yòng)方法:

       1)在消化緩沖液或其他(tā)相容緩沖液中(zhōng)加入所需量的IgG0.5~10mg/ml);

       2)Rhinogen® IdeS protease加入至IgG樣品中(zhōng);

       注意:每1μg IgG加1 unit IdeS蛋白酶進行消化;例如,加入1μl50 unitsIdeS溶液以消化50μg的IgG;

       3)37條件下孵育30~60分(fēn)鍾。

操作(zuò)說明:

       Rhinogen® IdeS protease能(néng)有(yǒu)效地切割人類,人源化,嵌合,羊,兔和猴IgG,并對小(xiǎo)鼠IgG2aIgG3具(jù)有(yǒu)較高活性。Rhinogen® IdeS protease也能(néng)切割許多(duō)Fc-融合蛋白以及抗體(tǐ)藥物(wù)偶聯物(wù)(antibody drug conjugates ,ADCs);

       1. IdeS protease不能(néng)切割小(xiǎo)鼠IgG1 / IgG2b,大鼠,豬,牛或山(shān)羊IgG。此外,它不能(néng)切割非IgG同種型,包括IgAIgMIgD和IgE;
       2. 理(lǐ)想的IgG濃度應在0.5~10mg/ml的範圍内;
       3. 酶切反應緩沖液pH為(wèi)6.0~8.0,最适pH6.5,且NaCl濃度不宜過高,建議消化緩沖液為(wèi)10mM sodium phosphate10mM NaCl,pH6.5;
       4. 對于小(xiǎo)鼠IgG2a和小(xiǎo)鼠IgG3的切割,增加IdeS蛋白酶的量(建議5倍至10倍作(zuò)為(wèi)起點)和孵育時間(2小(xiǎo)時至過夜);
       5. 通過SDS-PAGE很(hěn)容易确定IgG的切割;
       6. IdeS protease具(jù)有(yǒu)組氨酸标簽,便于從酶切反應體(tǐ)系中(zhōng)去除;
       7. 将消化産(chǎn)物(wù)與Protein A珠孵育30~60分(fēn)鍾後,可(kě)以獲得純化的F(ab’)2片段;
       8. 本産(chǎn)品僅供研究使用(yòng),不适用(yòng)于人或動物(wù)的診斷及治療用(yòng)途。


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常見問題

若需要其它包裝(zhuāng)規格,是否可(kě)以接受定制?
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