背景:

       内切糖苷酶 F3（Endo F3）可(kě)在寡糖N-連接的二乙酰基殼二糖聚糖核心中(zhōng)的兩個N-乙酰葡糖胺殘基之間進行切割，從而産(chǎn)生截短的糖分(fēn)子，其中(zhōng)一個N-乙酰氨基葡萄糖殘基則保留在天冬酰胺上。Endo F3對寡甘露糖和雜合分(fēn)子沒有(yǒu)活性。Endo F3可(kě)以較慢的速率切割非岩藻糖基化的雙角和三角複合寡糖，但僅限于肽連接的寡糖。雙角結構的核心岩藻糖基化可(kě)使其活性增加至400倍。核心岩藻糖基雙角結構是Endo F3的有(yǒu)效底物(wù)，即使在遊離的低聚糖中(zhōng)也是如此。Endo F3還可(kě)在遊離和蛋白質(zhì)連接的寡糖上對岩藻糖基化的三甘露糖核心結構進行切割。複合四角聚糖的天然去糖基化需要通過順序水解為(wèi)三甘氨酸二乙酰基殼二糖（Man3GlcNAc2）核心，然後再使用(yòng)Endo F3進行切割。

       Rhinogen^® Endo F3序列來源于Elizabethkingia meningoseptica，重組表達于E. coli，N端帶MBP融合蛋白，C端帶6×His标簽。Rhinogen^® Endo F3 切割遊離的或天冬酰胺連接的三觸角或 α-(1-6) 岩藻糖基化的雙觸角寡糖，以及三氨糖基殼二糖核心結構。非岩藻糖基化的雙觸角聚糖也會被切割，但速度會降低 40 倍。它在寡糖的二乙酰殼二糖核心中(zhōng)的兩個 N-乙酰氨基葡糖殘基之間裂解，産(chǎn)生一個截短的糖分(fēn)子，其中(zhōng)一個 N-乙酰氨基葡糖殘基留在天冬酰胺上。相反，PNGaseF 可(kě)完整去除寡糖。α1-3 岩藻糖基化會抑制酶活性，且對寡甘露糖和雜合分(fēn)子沒有(yǒu)活性。

産(chǎn)品規格：

       Rhinogen^® 内切糖苷酶 F3（Endo F3）包裝(zhuāng)規格如下：

配套試劑：

       Rhinogen^® 内切糖苷酶 F3（Endo F3）配套提供的試劑如下：

       Endo F3序列來源于Elizabethkingiameningoseptica，重組表達于E. coli，理(lǐ)論分(fēn)子量約74 kDa，N端帶MBP融合蛋白，C端帶6×His标簽。

産(chǎn)品質(zhì)量:

       1. 高純度：通過SDS-PAGE檢測，純度≥90％；

       2. 高活性：活性＞5U/ml；

酶活定義:

       在 37˚C、pH 4.5 條件下，在 1 分(fēn)鍾内催化 1 μM豬纖維蛋白原釋放 N-連接寡糖所需的酶量。

應用(yòng):

       1. 糖組學(xué)；

       2. 糖型分(fēn)析及糖基化位點的确定；

       3. 蛋白質(zhì)組學(xué)；

保存條件：

       采用(yòng)冰袋運輸，2-8℃可(kě)儲存12個月。避免反複凍融。

使用(yòng)注意事項：

       1. 對于不同的糖蛋白樣品，需要實驗摸索最适的酶濃度及反應時間。

       2. 反應體(tǐ)系可(kě)以線(xiàn)性擴大。

       3. 為(wèi)防止微生物(wù)污染，盡可(kě)能(néng)無菌取用(yòng)。

       4. 較高的酶濃度可(kě)以提高單個糖蛋白的消化效率，需要根據實際情況優化。

       5. 适當分(fēn)裝(zhuāng)以減少多(duō)次凍融帶來的活性損失。

       6. 本産(chǎn)品僅供研究使用(yòng)，不适用(yòng)于人或動的物(wù)診斷及治療用(yòng)途。