背景:
内切糖苷酶 F1(Endo F1)可(kě)在寡糖N-連接的二乙酰基殼二糖聚糖核心中(zhōng)的兩個N-乙酰葡糖胺殘基之間進行切割,從而産(chǎn)生截短的糖分(fēn)子,其中(zhōng)一個N-乙酰葡糖胺殘基則保留在天冬酰胺上。Endo F1可(kě)切割天冬酰胺連接的或遊離的高甘露糖(低聚甘露糖)和雜合結構,但不是複雜的低聚糖。雜合結構的核心岩藻糖基化會使Endo F1的切割速率降低超過50倍。另外,Endo F1可(kě)水解含有(yǒu)高甘露糖鏈的硫酸鹽,可(kě)在天然或非變性的去糖基化條件下使用(yòng)。該酶适用(yòng)于在天然條件下從糖蛋白中(zhōng)脫糖基化,适用(yòng)于各種糖組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)和質(zhì)譜應用(yòng)。
Rhinogen® Endo F1序列來源于Elizabethkingia meningoseptica,重組表達于E. coli,C端帶6×His标簽。不同于由Endo H,Endo F1可(kě)以從肽和蛋白質(zhì)中(zhōng)切割高甘露糖和一些雜合型 N-聚糖。
産(chǎn)品規格:
Rhinogen® 内切糖苷酶 F1(Endo F1)包裝(zhuāng)規格如下:
目錄号 |
規格 |
QPF-016-A |
0.33U/20μl |
QPF-016-B |
1U/60μl |
QPF-016-C |
3.3U/200μl |
配套試劑:
Rhinogen® 内切糖苷酶 F1(Endo F1)配套提供的試劑如下:
試劑 |
成分(fēn) |
規格 |
10×Glyco緩沖液5 |
500mMsodium phosphate,pH5.5 |
1ml |
Endo F1序列來源于Elizabethkingiameningoseptica,重組表達于E. coli,理(lǐ)論分(fēn)子量約32 kDa,C端帶6×His标簽。
産(chǎn)品質(zhì)量:
1. 高純度:通過SDS-PAGE檢測,純度≥90%;
2. 高活性:比活>16U/mg、活性>17U/ml;
3. 高穩定性:每批産(chǎn)品都經過嚴格的質(zhì)量控制,以實現産(chǎn)品批間穩定性。酶活定義:
在 37˚C、pH 5.5 條件下,在 1 分(fēn)鍾内催化 1 μM變性核糖核酸酶 B (RNase B) 釋放 N-連接寡糖所需的酶量。
應用(yòng):
1. 糖組學(xué);
2. 糖型分(fēn)析及糖基化位點的确定;
3. 蛋白質(zhì)組學(xué);
保存條件:
采用(yòng)冰袋運輸,2-8℃可(kě)儲存12個月。避免反複凍融。
使用(yòng)注意事項:
1. 對于不同的糖蛋白樣品,需要實驗摸索最适的酶濃度及反應時間。
2. 反應體(tǐ)系可(kě)以線(xiàn)性擴大。
3. 為(wèi)防止微生物(wù)污染,盡可(kě)能(néng)無菌取用(yòng)。
4. 較高的酶濃度可(kě)以提高單個糖蛋白的消化效率,需要根據實際情況優化。
5. 可(kě)适當分(fēn)裝(zhuāng)以減少多(duō)次凍融帶來的活性損失。
6. 本産(chǎn)品僅供研究使用(yòng),不适用(yòng)于人或動的物(wù)診斷及治療用(yòng)途。