背景:
螢火蟲熒光素酶(Firefly Luciferase)是一種分(fēn)子量為(wèi)61kDa的蛋白,因其在宿主細胞中(zhōng)無背景螢光,同時無需翻譯後修飾,檢測快速、可(kě)靠和方便,是上述應用(yòng)中(zhōng)報告基因的理(lǐ)想選擇。Bio-SteadyTM One-Step螢火蟲熒光素酶分(fēn)析試劑盒為(wèi)針對螢火蟲熒光素酶開發的一款發光穩定、适合高通量篩選的一步法檢測試劑盒,本試劑盒以D-熒光素(D-luciferin)為(wèi)底物(wù),在ATP、鎂離子和氧氣存在的條件下,可(kě)以被螢火蟲熒光素酶催化進行氧化脫羧反應,産(chǎn)生激活态的氧化熒光素(Oxyluciferin),并産(chǎn)生生物(wù)螢光(Bioluminescence)(圖1)。生物(wù)螢光與熒光素酶的啓動子活性成比例,間接反映了細胞刺激物(wù)的生物(wù)學(xué)活性。
圖1. 螢火蟲熒光素酶底物(wù)的發光原理(lǐ)
本試劑盒在常用(yòng)的細胞培養基中(zhōng)可(kě)提供超過5小(xiǎo)時的信号半衰期,并且不需要樣品預處理(lǐ)。在标準實驗室條件下,每小(xiǎo)時可(kě)實現數千個樣品的吞吐率,并且具(jù)有(yǒu)很(hěn)高的重現性,非常适合高通量和超高通量(96/384/1536孔)的檢測哺乳動物(wù)細胞中(zhōng)螢火蟲熒光素酶報道基因的表達。可(kě)以檢測最低10-20mol的熒光素酶,在10-20至10-14mol的酶濃度範圍内呈很(hěn)好的線(xiàn)性關系。不同熒光素酶檢測試劑盒的發光值衰減對比如圖2所示。
注意:實際讀數會因細胞數量、轉染效果、檢測儀器等的不同而存在差異,圖中(zhōng)數據僅供參考。
圖2. Rhinogen®不同熒光素酶檢測試劑盒的發光值衰減對比
産(chǎn)品規格:
名(míng)稱 |
貨号 |
規格 |
Bio-SteadyTM One-Step螢火蟲熒光素酶測定試劑盒 |
RA-GL06 |
50mL |
試劑盒組分(fēn): |
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• 熒光素酶反應底物(wù)(凍幹粉) |
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1Vial |
• 熒光素酶反應緩沖液 |
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50mL |
Bio-SteadyTM One-Step 螢火蟲熒光素酶分(fēn)析試劑盒主要适用(yòng)于高通量和超高通量(96/384/1536孔)的檢測哺乳動物(wù)細胞中(zhōng)螢火蟲熒光素酶報告基因的表達,是抗體(tǐ)篩選、抗體(tǐ)質(zhì)量控制的有(yǒu)效手段。
注意事項:
我們也提供一系列ADCC、ADCP效應細胞株,詳情請咨詢techserv@rhinobio.com,或者登陸公(gōng)司官網www.rhinobio.com 查詢。