背景:
博來黴素(Zeocin)是一種從Streptomyces verticillus分(fēn)離得到糖肽類銅離子螯合抗生素,博來黴素呈現淺藍色。當與銅離子螯合時,博來黴素沒有(yǒu)毒性作(zuò)用(yòng)。當其進入細胞内,銅離子會被還原并移除,此時博來黴素會發揮其毒性,通過插入DNA中(zhōng),使DNA裂開,導緻細胞死亡。基因Sh ble編碼一種大小(xiǎo)約14kDa的蛋白質(zhì),可(kě)使表達該基因的細胞獲得對Zeocin的抗性。該蛋白可(kě)與Zeocin抗生素結合,阻止其與DNA結合,從而使細胞獲得對Zeocin的抗性。
在Escherichia coli中(zhōng),博來黴素的選擇濃度範圍推薦為(wèi)25-50 μg/ml,含博來黴素的LB平闆(yeast extract 5 g/l, Tryptone 10 g/l, NaCl 5 g/l, Agar 15 g/l, pH 7.5)可(kě)在4℃保存1個月。在哺乳動物(wù)細胞中(zhōng),博來黴素的選擇濃度範圍為(wèi)50-1000 μg/ml,常規為(wèi)250-400μg/ml,應針對每種細胞系進行優化。
用(yòng)途:
用(yòng)于細菌、真菌轉化和哺乳動物(wù)轉染系統中(zhōng)耐藥細胞的選擇。
包裝(zhuāng)規格:
貨号 |
規格 |
濃度 |
性狀 |
RA-AD05 |
0.5ml |
100mg/ml |
無菌水溶液 |
保藏條件/穩定性:
冷凍運輸。-20℃避光保存。儲存合理(lǐ)的情況下,可(kě)穩定保存6個月。
注意事項:
1. 當操作(zuò)博來黴素溶液時請戴手套、穿着實驗服、佩戴防護眼鏡;
2. 博來黴素對光敏感。請避光保存含博來黴素的抗性平闆、培養基;
3. 使用(yòng)博來黴素作(zuò)為(wèi)E.coli的篩選抗生素時,請使用(yòng)低鹽(NaCl 5 g/L)的LB培養基,pH請調節至7.5,過酸或者過堿的培養基都會抑制博來黴素的活性;
4. 請将博來黴素保存在-20℃,使用(yòng)時在冰上融化。