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大鼠胰島細胞分(fēn)離試劑盒
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RA-COL08
1kit
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産(chǎn)品概述

背景:

      大鼠胰島細胞可(kě)以用(yòng)于胰島生理(lǐ)學(xué)和病理(lǐ)學(xué)研究,以及糖尿病相關藥物(wù)篩選和毒性評估。通過分(fēn)離和培養大鼠胰島細胞,可(kě)以在體(tǐ)外模拟胰島的生理(lǐ)和病理(lǐ)狀态,例如胰島素分(fēn)泌、糖代謝(xiè)等。可(kě)以使用(yòng)大鼠胰島細胞研究糖尿病的發病機制,例如胰島素抵抗、胰島細胞功能(néng)受損等,也可(kě)以用(yòng)于篩選和評估治療糖尿病的藥物(wù)。此外,大鼠胰島細胞還可(kě)以用(yòng)于研究其他(tā)代謝(xiè)性疾病,例如胰島素抵抗綜合征和多(duō)囊卵巢綜合征等。

       膠原酶的化學(xué)名(míng)為(wèi)膠原蛋白水解酶(Collagenase),能(néng)夠裂解中(zhōng)性氨基酸X和甘氨酸之間的鍵,其序列為(wèi)Gly-X-Y-Gly-X-Y,這在膠原蛋白中(zhōng)發現的頻率很(hěn)高。它能(néng)在生理(lǐ)PH和溫度條件下特異性地水解天然膠原蛋白的三維螺旋結構,如皮膚肌腱血管和骨骼,而不損傷其它蛋白質(zhì)和組織。膠原蛋白酶分(fēn)解适用(yòng)于人類腫瘤小(xiǎo)鼠腎髒人類成人和胎兒大腦和許多(duō)其他(tā)組織包括上皮細胞的培養。膠原酶的化學(xué)本質(zhì)是一種蛋白質(zhì),因此,它對溫度、PH和導緻蛋白質(zhì)變性的各種因素均非常敏感,極易受到外界條件的影響而改變其本身的構象和性質(zhì)。

       嗜熱菌蛋白酶(Thermolysin)是一種熱穩定的金屬蛋白酶。高消化溫度為(wèi)作(zuò)為(wèi)一種選擇性的變性劑,促進底抗蛋白水解的蛋白的消化。嗜熱菌蛋白酶優先在疏水性的氨基酸殘基N末端進行剪切,包括亮氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、異亮氨酸、丙氨酸和甲硫氨酸。其最佳消化溫度範圍在65-85℃之間。嗜熱菌蛋白酶酶活性的最佳pH範圍為(wèi)5.0-8.5。


概述:

       Kinase-TurboTM 激酶活性檢測試劑盒是一種通過化學(xué)發光法測定激酶反應後溶液中(zhōng)ATP的剩餘量,從而進行定量來檢測激酶活性的試劑盒。激酶在反應過程中(zhōng)會催化ATP上的磷酸基團轉移到底物(wù)的羟基上,從而使ATP轉變為(wèi)ADP,以此根據ATP的減少量來定量激酶的活性(如圖1)。本試劑盒借助ATP依賴的熒光素酶催化的熒光素發光反應,通過化學(xué)發光信号測定細胞内ATP含量。這樣就可(kě)以通過設置ATP的标準曲線(xiàn),來定量激酶反應體(tǐ)系中(zhōng)的ATP量,從而計算ATP的減少量,最終計算出激酶的活性。激酶的活性與ATP剩餘量成反比,即ATP剩餘量越少,發光值越低,激酶活性就越高;若ATP剩餘量越多(duō),發光值就越高,激酶活性則越低。

       Kinase-TurboTM 激酶活性檢測試劑盒(貨号:RA-GL13)可(kě)以适用(yòng)最高濃度為(wèi)10μM的ATP,且在0-10μM範圍内線(xiàn)性呈現良好(如圖2);Kinase-TurboTM Plus激酶活性檢測試劑盒(貨号:RA-GL14)可(kě)以适用(yòng)最高濃度為(wèi)100μM的ATP,并在2 -100μM範圍内線(xiàn)性呈現良好(如圖3);Kinase-TurboTM Max激酶活性檢測試劑盒(貨号:RA-GL15)可(kě)以适用(yòng)最高濃度為(wèi)500μM的ATP,在3-500μM範圍内線(xiàn)性呈現良好(如圖4)。

應用(yòng):

       可(kě)用(yòng)于檢測蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和糖等物(wù)質(zhì)的激酶活性,适用(yòng)多(duō)種激酶和激酶底物(wù)組合檢測。

試劑包裝(zhuāng):

試劑名(míng)稱 貨号 規格
重組膠原酶G RA-COL03-E 120U
重組膠原酶H RA-COL04-E 510U
嗜熱菌蛋白酶 RA-COL05-E 300μg


産(chǎn)品特性:

      1. 可(kě)使用(yòng)較高的ATP濃度:線(xiàn)性響應高達500μM ATP;
      2. 可(kě)以檢測多(duō)種激酶和激酶底物(wù)組合,包括肽、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和糖底物(wù);
      3. 可(kě)在不處理(lǐ)底物(wù)的情況下直接進行分(fēn)析;
      4. 進行批量處理(lǐ),高度穩定的發光信号,3小(xiǎo)時左右仍能(néng)保持50%以上的信号;
      5. 可(kě)檢測已知激酶抑制劑,且能(néng)區(qū)分(fēn)ATP競争性和ATP非競争性激酶抑制劑;
      6. 用(yòng)這種快速、均勻、無放射性的檢測方法篩選大量文(wén)庫化合物(wù)。

保存條件:

      置于-70℃保存。試劑使用(yòng)前請恢複至室溫,複溶後置室溫使用(yòng)。為(wèi)了保證産(chǎn)品穩定性,複溶後的試劑請立即使用(yòng)。避免試劑反複凍融。

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