背景:
蛋白激酶是藥物(wù)發現中(zhōng)最重要的類别之一,它們在多(duō)種細胞事件的調節中(zhōng)起着至關重要的作(zuò)用(yòng),已知至少有(yǒu)1200種蛋白激酶參與細胞功能(néng)的調節。激酶既作(zuò)為(wèi)跨膜酶又(yòu)作(zuò)為(wèi)胞質(zhì)酶存在,它們磷酸化絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸氨基酸殘基,基于這些底物(wù)特異性,激酶分(fēn)為(wèi)兩組,絲氨酸/蘇氨酸激酶和酪氨酸激酶。
激酶通過磷酸化其各自的下遊特定底物(wù)蛋白來發揮其作(zuò)用(yòng),它們催化ATP或GTP的γ-磷酸轉運到底物(wù)蛋白中(zhōng)絲氨酸、蘇氨酸和酪氨酸的羟基或脂質(zhì)中(zhōng)的糖基部分(fēn),并啓動一系列激活控制事件,包括細胞的生長(cháng)、分(fēn)化、分(fēn)裂和腫瘤促進。細胞中(zhōng)激酶缺乏受控活性被認為(wèi)是造成所有(yǒu)主要人類病理(lǐ)狀況的原因,例如癌症、心血管疾病、神經退行性疾病和代謝(xiè)紊亂,因此它已在廣泛研究中(zhōng)被用(yòng)作(zuò)腫瘤治療的靶點。
概述:
Kinase-TurboTM 激酶活性檢測試劑盒是一種通過化學(xué)發光法測定激酶反應後溶液中(zhōng)ATP的剩餘量,從而進行定量來檢測激酶活性的試劑盒。激酶在反應過程中(zhōng)會催化ATP上的磷酸基團轉移到底物(wù)的羟基上,從而使ATP轉變為(wèi)ADP,以此根據ATP的減少量來定量激酶的活性(如圖1)。本試劑盒借助ATP依賴的熒光素酶催化的熒光素發光反應,通過化學(xué)發光信号測定細胞内ATP含量。這樣就可(kě)以通過設置ATP的标準曲線(xiàn),來定量激酶反應體(tǐ)系中(zhōng)的ATP量,從而計算ATP的減少量,最終計算出激酶的活性。激酶的活性與ATP剩餘量成反比,即ATP剩餘量越少,發光值越低,激酶活性就越高;若ATP剩餘量越多(duō),發光值就越高,激酶活性則越低。
Kinase-TurboTM 激酶活性檢測試劑盒(貨号:RA-GL13)可(kě)以适用(yòng)最高濃度為(wèi)10μM的ATP,且在0-10μM範圍内線(xiàn)性呈現良好(如圖2);Kinase-TurboTM Plus激酶活性檢測試劑盒(貨号:RA-GL14)可(kě)以适用(yòng)最高濃度為(wèi)100μM的ATP,并在2 -100μM範圍内線(xiàn)性呈現良好(如圖3);Kinase-TurboTM Max激酶活性檢測試劑盒(貨号:RA-GL15)可(kě)以适用(yòng)最高濃度為(wèi)500μM的ATP,在3-500μM範圍内線(xiàn)性呈現良好(如圖4)。
應用(yòng):
可(kě)用(yòng)于檢測蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和糖等物(wù)質(zhì)的激酶活性,适用(yòng)多(duō)種激酶和激酶底物(wù)組合檢測。
試劑包裝(zhuāng):
試劑名(míng)稱
貨号
規格
Kinase-TurboTM 激酶活性檢測試劑
RA-GL13-A
10ml
RA-GL13-B
10×10ml
Kinase-TurboTM Plus激酶活性檢測試劑
RA-GL14-A
10ml
RA-GL14-B
10×10ml
Kinase-TurboTM Max激酶活性檢測試劑
RA-GL15-A
10ml
RA-GL15-B
10×10ml
産(chǎn)品特性:
保存條件:
置于-70℃保存。試劑使用(yòng)前請恢複至室溫,複溶後置室溫使用(yòng)。為(wèi)了保證産(chǎn)品穩定性,複溶後的試劑請立即使用(yòng)。避免試劑反複凍融。